您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
神经上皮干细胞蛋白(nestin)文献资料
-
不同厚度神经球冰冻切片免疫荧光细胞化学染色结果的比较
目的 探索适合免疫荧光细胞化学染色的神经球佳冰冻切片厚度.方法 选取悬浮培养10～12 d的神经球,制作厚度分别为4、7、10μm的冰冻切片.采用免疫荧光细胞化学染色比较神经球神经上皮干细胞蛋白(nestin)的表达和定位.结果 培养10～12 d的神经球直径为200～ 250 μm,状态良好,折光性强,呈圆球状,周边有毛刺.4μm的神经球冰冻切片制作较难,容易卷片,但细胞层次清楚,染色均匀,密疏适宜,可较清楚计数细胞.成像清楚.胞核清晰,可见较多nestin染色阳性的完整胞质包绕4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色阳性的胞核,能观察更多的细胞间细节.7μm切片较4μm切片制作容易,切片较平整,细胞层次不如4μm切片清楚,染色较均匀.所含细胞数较4 μm多,可粗略计算细胞数.荧光拍照不能完全对焦,可见部分完整细胞形态.10 μm的冰冻切片制作相对容易,切片平整,但细胞层次不清楚,堆叠严重,成像不清楚,难以看到完整细胞形态.结论 4μm厚度的神经球冰冻切片较适合进行免疫荧光细胞化学染色和分析.
关键词： 神经球 冰冻切片 厚度 悬浮培养 神经上皮干细胞蛋白(nestin)
