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Urocortin Ⅰ后处理对缺氧/复氧大鼠心肌线粒体膜电位的影响
目的 探讨Urocortin Ⅰ后处理对缺氧/复氧后成年大鼠心肌细胞线粒体膜电位的影响.方法 利用离体心脏灌注装置(MPA)分离成年大鼠心肌细胞,培养24h后进行细胞计数并随机分为正常组(N组)、缺氧/复氧组(I/R组)、Urocortin Ⅰ后处理组(Ucn Ⅰ组)、5-羟葵酸拮抗Urocortin Ⅰ组(5-HD+ Ucn Ⅰ组).N组在预设37℃培养箱中持续培养135 min;余3组均予缺氧40 min,复氧60 min建立缺氧/复氧模型.其中Ucn Ⅰ组在缺氧末复氧前给予Ucn Ⅰ处理30 min;5-HD+Ucn Ⅰ组在Ucn Ⅰ处理前给予特异性线粒体ATP敏感性钾通道(mito-KATP)拮抗剂5-HD处理5 min,余处理同Ucn Ⅰ组.各组于复氧末加入JC-1荧光探针并用激光共聚焦显微镜观察心肌细胞膜电位的变化.结果 N组心肌细胞高膜电位比例均高于其余各组(P＜0.01),而Ucn Ⅰ组高膜电位比例高于I/R组和5-HD+ Ucn Ⅰ组(P＜0.05),I/R组与5-HD+ Ucn Ⅰ组比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Ucn Ⅰ后处理可防止缺氧/复氧后心肌细胞线粒体膜电位的下降,保护复氧后心肌线粒体的膜电位.
关键词： Urocortin Ⅰ 后处理 缺氧/复氧 线粒体膜电位 心肌保护 -
Urocortin Ⅰ对缺氧/复氧损伤心肌细胞钙离子的影响
目的 观察UcnⅠ对成年大鼠缺氧/复氧损伤心肌细胞钙离子的影响.方法 通过Langendorff离体心脏灌注系统,用Ⅱ型胶原酶逆行灌注法分离成年大鼠心肌细胞,培养20 h后随机分为正常组(N组)、缺氧/复氧组(L/R组)、UrocortinⅠ组(UcnⅠ组)、5-羟葵酸+UrocortinⅠ组(5- HD+UcnⅠ组).各处理组心肌细胞加入Fluo - 3/AM荧光探针,用激光共聚焦显微镜检测细胞内钙的荧光强度.结果 I/R组心肌细胞内钙离子浓度较N组高(P＜0.05),UcnⅠ组较N组荧光强度明显增强(P＜0.01),而5- HD+UcnⅠ组心肌细胞内钙离子荧光强度与UcnⅠ组比较明显降低(P＜0.05).结论UcnⅠ可使成年大鼠缺氧/复氧损伤心肌细胞内钙离子浓度升高,5- HD则可阻断UcnⅠ的作用,提示UcnⅠ导致缺氧/复氧后心肌细胞钙离子浓度的升高可能跟ATP敏感性钾通道开放有关.
关键词： 缺氧/复氧损伤 Urocortin Ⅰ 钙离子 心肌细胞
