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抗谷氨酸脱羧酶抗体在糖尿病相关癫?发作中的作用及研究进展
糖尿病（DM ）是一种累及全身各个系统的代谢性疾病，糖尿病各种代谢条件可引起?性发作。抗谷氨酸脱羧酶抗体（anti‐glutamic acid decarboxy‐lase antibodies ，AGAD‐Ab）是糖尿病的免疫标志物，它与癫?关联的研究在逐渐增多，并发现AGAD‐Ab与难治性癫?和颞叶癫?均密切相关。所以 AGAD‐Ab可能在两者之间的关联上扮演着某种角色，可能成为诊断糖尿病相关癫?的重要的免疫标志物。
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用于IDDM基因治疗的rAAV2-GAD-Ig的研制
目的: 构建重组真核表达载体pSNAV-GAD-Ig[GAD-Ig融合基因是由小鼠GAD(glutamic acid decarboxylase)基因插入到小鼠IgG3重链(Ig)基因的N端而成的], 制备含GAD-Ig融合基因cDNA的重组缺陷型腺相关病毒-2(rAAV2-GAD-Ig), 并探讨rAAV2所介导的GAD-Ig是否能诱导I型糖尿病(IDDM)动物模型-NOD(nonobese diabetic)小鼠产生特异性免疫耐受.方法: 从含GAD-Ig融合基因的中介载体BSSK(BSSK-GAD-Ig)中, 用PCR方法扩增目的基因片段, 并克隆入真核表达载体pSNAV 中, 构建重组真核表达载体pSNAV-GAD-Ig.以脂质体法将pSNAV-GAD-Ig转染到rAAV2包装细胞BHK-21中, 产生rAAV2-GAD-Ig.采用RT-PCR、 Western blot和ELISA法, 检测rAAV2-GAD-Ig感染的BHK-21细胞中目的基因的表达.应用GAD抗原体外诱导特异性T细胞的二次应答, 来检测rAAV2所介导的GAD-Ig是否能诱导NOD小鼠产生特异性免疫耐受.结果: GAD-Ig目的基因已整合到靶细胞的基因组中, 并能以分泌形式表达目的蛋白GAD-Ig.将rAAV2-GAD-Ig肌注后, NOD小鼠能产生特异性免疫耐受.结论: 获得了可用于NOD小鼠治疗研究的rAAV2-GAD-Ig.
