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氚标-脱氧葡萄糖摄取文献资料
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体外Akt基因转染对骨髓间充质干细胞葡萄糖转运载体-4表达和易位的影响
目的 探讨葡萄糖转运载体(GLUT)-4是否参与骨髓间充质干细胞(MSCs)的葡萄糖转运以及Akt基因转染提高MSCs耐缺氧能力是否与GLUT-4易位和表达有关.方法 将经Akt基因转染和未转染的MSCs均行常氧(5% CO2)和缺氧(94% N2、1%O2和5%CO2)37 ℃孵育8 h.放射同位素法检测氚标-脱氧葡萄糖(3 H-G)的摄取量,免疫细胞化学染色、Western blot和RT-PCR分别检测GLUT-4的蛋白质和mRNA表达.结果 ①缺氧转染组的3 H-G摄取量是缺氧非转染组的(1.39±0.13)倍(P＜0.05),但仍低于常氧非转染组(P＜0.05).②MSCs在常氧或缺氧、Akt基因转染或无转染的条件下均可表达GLUT-4蛋白.与常氧非转染组比较,缺氧非转染组GLUT-4 mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P＜0.05).③与缺氧非转染组比较,缺氧转染组的GLUT-4 mRNA[(1.756±0.152)倍]和蛋白[细胞总GLUT-4蛋白(1.653±0.312)倍,细胞膜GLUT-4蛋白(2.041±0.258)倍]的表达水平明显提高(P＜0.05),且GLUT-4蛋白易位明显;但与常氧非转染组比较,其GLUT-4 mRNA和蛋白的表达水平仍较低(P＜0.05).④MSCs的3 H-G摄取量与细胞膜中GLUT-4蛋白的表达呈正相关(r=0.415,P=0.001).结论 GLUT-4可能参与MSCs的葡萄糖转运,Akt基因提高MSCs耐缺氧能力可能与提高GLUT-4的表达和易位有关.
