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  • 肝靶向干扰素(IFN-CSP)融合基因原核表达条件的优化

    作者:黄演婷;卢雪梅;汪洁;金小宝;朱家勇

    本研究目的是优化肝靶向干扰素(IFN-CSP)在大肠杆菌中的诱导表达条件,以提高蛋白表达量.通过考查培养基pH值、诱导剂IPTG浓度、诱导温度、诱导时间和起始菌浓度等五个因素对IFN-CSP融合基因原核表达量的影响,在此基础上,从上述影响因素中各选取4个水平进行正交实验作进一步分析.结果表明,起始菌浓度和诱导温度为影响表达的主要因素,佳组合诱导条件为OD600为0.8时开始诱导、诱导4h、诱导温度37℃、诱导剂IPTG浓度0.4 mmol/L、培养基pH值为6.0,融合蛋白的表达量高达74.3%.通过表达优化后,IFN-CSP的产量为688.8 mg/L,提高了1.2倍.这为进一步制定生产工艺和评价IFN-CSP的生物活性奠定基础.

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