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  • 心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)合成肽制备、鉴定及抗体研究

    作者:王德芝;周则卫;刘鉴峰;徐文清;郝建秀;杨福军;张春明

    目的 制备人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnI)合成肽并鉴定其质量.方法 根据人cTnI氨基酸序列,结合计算机软件分析,预测cTnI分子的亲水性、抗原性和同源性,采用固相多肽合成法合成了cTnI分子98~110位氨基酸肽段序列(13肽,RQLHARVDKVDEE).经与载体蛋白KLH偶联作为免疫原制备抗cTnI-KLH抗体,用间接ELISA方法鉴定其免疫原性.结果 采用多肽合成法合成的cTnI合成多肽(13肽),经HPLC纯化后,以其制备的cTnI-KLH纯度达到95%.免疫学实验证实,制备的抗体效价达到1∶100 000.结论 本研究制备的肽段连接物具有较强的免疫原性,并与生物提取人cTnI具有较好的交叉反应性.cTnI合成肽的研制为临床cTnI检测试剂的国产化奠定了基础.

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