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抗金葡菌肽聚糖模拟肽抗血清的被动保护作用
目的 探讨针对金葡菌肽聚糖(PGN)模拟序列抗血清的被动保护作用.方法 应用在线软件(http://www.ddg-pharmfac.net/mhcpred/MHCPred)和T细胞表位分析软件DNAstar对模拟PGN表位的SP31 (ATWSHHLSSAGL)进行分析,改造SP31序列后合成四分枝多价抗原肽(multiple antigenic peptide,MAP)MAP-P31.1,以MAP-P31.1免疫小鼠和家兔,体外鉴定抗MAP-P31.1血清对MRSA/MSSA杀菌作用,体内观察饱和硫酸铵纯化免疫兔血清对金葡菌攻击动物的保护作用.结果 将原始SP31序列改造为ATWSHHLSSAGLGGAS序列.2种抗MAP-P31.1血清均可结合PGN.用热灭活S.aureus再次加强免疫,抗血清的效价可有10倍以上升高(P<0.05).抗MAP-P31.1血清在有补体或无补体作用下均有显著抑菌/杀菌作用(P<0.01),且显著优于抗金葡菌免疫的全菌血清及抗MAP-P31血清(P<0.001).抗MAP-P31.1血清显著增强小鼠巨噬细胞对MRSA与MSSA的吞噬作用,过继转移后可保护小鼠抵御金葡菌致死性攻击(P<0.05),小鼠肾脏、脾脏中荷菌量显著降低(P<0.05).结论 模拟肽MAP-P31.1作为免疫原所诱导的抗血清具备了体外对MRSA的杀菌抑制作用,但体内对MRSA的保护作用并不显著.