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脑匀浆去蛋白液文献资料
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缺氧预适应小鼠脑匀浆去蛋白液中抗缺氧有效成分的初步研究
目的 探讨缺氧预适应小鼠脑匀浆去蛋白液(deproteinized brain tissue extracts of hypoxia-preconditioned mice, DHP)对NGF诱导分化的PC12细胞缺氧耐受性的影响及其与腺苷的关系.方法 复制缺氧预适应小鼠模型,高氯酸法制备DHP.HPLC法检测DHP中腺苷含量及正常小鼠脑匀浆去蛋白液(deproteinized brain tissue extracts of normal mice, DN)中腺苷含量.在已分化PC12细胞中加入DHP,以DN作对照,以1.0、10.0、100.0 μmol/L的腺苷为阳性对照,分别于缺氧(2%O2)培养24、48、72 h后检测MTT值、LDH透出率以及72 h晚期凋亡率;在DHP、10.0 μmol/L腺苷阳性对照组中分别加入腺苷A1、A2A受体阻断剂DPCPX、SCH 58261(5.0 μmol/L),以DN作对照,缺氧24、48、72 h后分别检测各组MTT值、LDH透出率.结果 DHP中腺苷含量显著高于DN;缺氧24 h时, DHP组MTT值显著高于DN组, 其 LDH透出率显著低于DN组.随缺氧时间延长, DHP保护作用逐渐减弱,至72 h时,DHP组MTT值、LDH透出率、晚期凋亡率与DN组均无显著差异;A2A受体阻断剂SCH 58261可阻断DHP的保护作用.结论 DHP在缺氧初期对分化PC12细胞的保护作用与缺氧预适应中腺苷含量增加有关, 保护作用可能通过A2A受体实现.
