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HPV16阳性和阴性患者宫颈癌组织中miR-27a-3p和HOXB8蛋白的表达差异及其机制研究
目的:探讨miR-27a-3p和同源盒B8(HOXB8)蛋白在人乳头瘤病毒16型阳性[HPV16(+)]和阴性[HPV16(-)]患者宫颈癌组织中表达的差异及其机制.方法:选取2012年1月-2016年1月于我院就诊的宫颈癌患者120例,根据其是否感染HPV16分为HPV16(+)组(60例)和HPV16(-)组(60例).采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测两组患者宫颈癌组织中miR-27a-3p和HOXB8 mRNA的表达水平,采用蛋白印迹法检测HOXB8蛋白的表达水平,采用巢式降落式甲基化特异性聚合酶链反应法检测miR-27a-3p启动子区DNA甲基化水平,采用染色质免疫共沉淀-定量聚合酶链反应法检测miR-27a-3p启动子区组蛋白甲基化水平;培养人宫颈癌细胞系SiHa细胞株,考察转染miR-27a-3p模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)后miR-27a-3p和HOXB8 mRNA的表达水平.结果:HPV16(+)组患者宫颈癌组织中miR-27a-3p的表达水平显著低于HPV16(-)组患者,HOXB8 mRNA和蛋白表达水平、miR-27a-3p启动子区DNA甲基化水平和组蛋白甲基化水平均显著高于HPV16(-)组患者,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).在SiHa细胞转染miR-27a-3p mimic后,miR-27a-3p的表达水平显著升高,而HOXB8 mRNA的表达水平显著降低;转染miR-27a-3p inhibitor后,miR-27a-3p的表达水平显著降低,而HOXB8 mRNA的表达水平则显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01).结论:HPV16可能通过启动子区DNA甲基化和组蛋白甲基化下调miR-27a-3p的表达,从而影响宫颈癌的发生与发展,HOXB8蛋白可能是其作用靶点.
