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  • 上调人1型大麻素受体表达诱导人宫颈癌细胞凋亡的实验研究

    作者:张萌;龙明;郑慧峰;杨缙;李晶

    目的:通过构建基因真核表达载体,探讨人1型大麻素受体(hCB1R)对人宫颈癌 HeLa细胞体外凋亡的作用及机制。方法构建GV230‐hCB1R质粒,经双酶切、测序鉴定后,转染 HeLa细胞,免疫印迹(Western blot)法及免疫荧光细胞化学染色(ECL)联合激光扫描共聚焦显微镜技术检测hCB1R表达及细胞定位;流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法及实时荧光定量PCR(qRT‐PCR)检测hCB1R、Bcl‐2、Bax、Bad的表达。结果 hCB1R转染 HeLa细胞后表达相对分子质量为40000的hCB1R蛋白,细胞膜和细胞质中均有hCB1R表达;过表达的hCB1R ,可上调Bax、Bad的表达,抑制Bcl‐2的表达,流式细胞术检测结果显示HeLa细胞株呈现凋亡,hCB1R对宫颈癌HeLa细胞株的生长表现出明显的抑制作用,促进宫颈癌 HeLa细胞凋亡。结论上调HeLa细胞hCB1R表达可增强Bax、Bad表达,抑制Bcl‐2表达,诱导细胞凋亡。

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