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MALDI-TOF质谱仪进行临床酵母菌鉴定的方法学评价
目的 探讨MALDI-TOF质谱仪用于临床酵母菌鉴定的优越性,为临床真菌感染提供早期诊断、治疗的依据.方法 收集该院2015年8月至2016年3月临床分离酵母菌206株,分别用MALDI-TOF质谱仪、VITEK2 Compact微生物鉴定仪和显色培养法进行鉴定,以内转录间区序列测序结果 为终确认结果 .比较MALDI-TOF质谱仪、VITEK2 Compact微生物鉴定仪和显色培养法鉴定的准确性.结果 3种方法 鉴定酵母菌的准确率分别为VITEK2 Compact鉴定仪82.5%,显色培养法67.0%,MALDI-TOF质谱仪92.7%.MALDI-TOF质谱仪与VITEK2 Compact鉴定仪比较,差异有统计学意义(P=0.006),MALDI-TOF质谱仪与显色培养法比较,差异有统计学意义(P=0.001).结论 MALDI-TOF质谱仪与VITEK2 Compact鉴定仪、显色培养法相比,具有快速、操作简便、结果 准确等优点.
关键词： MALDI-TOF质谱仪 酵母菌 内转录间区测序 -
“双甲酸夹心”快速样本前处理方法的建立及在丝状真菌质谱鉴定中的初步应用
目的 解决布鲁克microflex LT MALDI-TOF质谱仪在临床微生物学实验室丝状真菌鉴定中样本处理技术操作繁琐,耗时较长的弊端,建立一种快速、简便的丝状真菌质谱鉴定样本前处理方法.方法 以2017年1月～2018年3月陕西省人民医院门诊及住院患者临床标本分离到的各种丝状真菌为研究对象,采用“双甲酸夹心”法进行上机前处理,即于96孔不锈钢靶板上用无菌微量吸头滴加1μl甲酸,再选取培养基上生长的丝状真菌菌落(幼龄菌丝体好)用蘸取少许甲酸溶液的无菌牙签挑取菌丝体与甲酸溶液混合并进行充分研磨,待其自然干燥后在其表面再次滴加1μl的甲酸溶液,干燥后再加1μl基质液(仪器配套),待干燥后即可上机.对检测结果采用形态学和基因测序方法进行确证.结果 新建方法前处理鉴定的丝状真菌有曲霉菌、青霉菌、拟青霉、镰刀菌、皮肤癣菌、接合菌、暗色真菌、双向真菌,并且对一些形态不典型或少见丝状真菌都能正确鉴定到种,如裂褶菌、红色单囊菌等.共鉴定菌株158株,其中113株可鉴定到种,31株鉴定到属,无法鉴定14株.结论 新建立的丝状真菌样本快速前处理方法,大大缩短了样本前处理实验流程,具有快速、简便、高效、极低实验成本、鉴定正确率较高的特点,可快速为临床提供丝状真菌鉴定结果,使患者得到及时有效的抗真菌治疗.
关键词： 丝状真菌 双甲酸夹心法 MALDI-TOF质谱仪
