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TNF-α、IFNα-1b和WY14643对鼠贮脂细胞及其表达PPAR-α的影响
目的:观察肿瘤坏死因子α( TNF-α)、α干扰素( IFN-α) 1b和匹立尼酸( WY14643) 对鼠贮脂细胞及其表达的过氧化物酶体增生激活受体( PPAR-α)的影响.方法:选用大鼠贮脂细胞株,将培养的贮脂细胞分为对照组、 TNF-α组、 IFN-α 1b组、 WY14643组、 TNF-α+ IFN-α 1b组和 TNF-α+ WY14643组.分别加入各作用因素,按照不同的时间点收集细胞标本,采用流式细胞仪观察细胞生长周期变化 ;透射电镜观察细胞超微结构改变 ;免疫组化和 Western blotting 检测 PPARα表达情况.结果: MTT检测: TNFα在 50 U/mL浓度可明显导致贮脂细胞增殖激活 ;而 IFN-α 1b在 50 U/mL浓度对 TNF-α激活贮脂细胞无影响.透射电镜观察到 IFN-α 1b作用组贮脂细胞有明显的凋亡现象发生,而 TNF-α+ IFN-α 1b组贮脂细胞形态未见异常.通过免疫组化和 Western blot检测,观察到 PPAR-α在贮脂细胞的表达随 TNF-α的作用而增加.结论: TNF-α在 50 U/mL即可明显激活贮脂细胞 ;IFN-α 1b对 TNF-α使贮脂细胞增殖激活的过程有抑制作用 ;其机制可能是通过诱导肝脏贮脂细胞凋亡而产生.从体外培养方面证实了 IFN-α 1b具有抗肝纤维化的作用 ;验证了 PPARα对 TNF-α具有抑制作用的观点 ;为临床上对肝纤维化的治疗和 PPAR-α激动剂在临床上的应用提供了较好的理论依据.