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ns 1基因文献资料
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H5N1亚型禽流感病毒ns1基因修饰
目的:对H5N1亚型禽流感病毒株(A/Qa/ST/852/01)的ns 1基因进行修饰并构建ns 1基因的真核表达载体.方法:用RT-PCR方法扩增A/Qa/ST/852/01的ns 1基因,之后以扩增产物为模板,采用多重PCR技术对ns 1基因进行修饰,将缺失的15个核苷酸片段插入ns 1基因中,并将其克隆到真核表达载体,构建pcDNA 3.1/ns 1重组质粒.结果:RT-PCR产物测序显示,A/Qa/ST/852/01 ns 1基因开放阅读框全长678 bp,编码225个氨基酸.构建的重组质粒经酶切鉴定和序列测定与预期相一致.结论:成功将缺失的15个核苷酸片段引入A/Qa/ST/852/01的ns 1基因中,重组质粒的构建为NS1蛋白功能研究奠定了基础.