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补肾祛湿活血中药对模拟体外骨重塑作用的细胞特征的影响
目的探讨补肾活血中药（珍骨丸）与祛湿活血中药（骨刺风湿丸）对体外骨重塑作用的影响。方法将MC3T3－E1细胞、 RAW264．7细胞分别诱导为成骨细胞（osteoblasts， OB）与破骨细胞（osteoclasts， OC），并将两者共培养。通过免疫细胞化学染色鉴定该共培养体系构建成功与否；以灌胃的方法分别将双醋瑞因、珍骨丸及骨刺风湿丸制备成含药血清；运用含药血清处理共培养细胞并进行Western blotting和Real－time PCR分析。结果珍骨丸与骨刺风湿丸处理共培养细胞后骨保护素（osteoprotegerin， OPG）表达显著上升（P＜0．05），糖蛋白130（glycoprotein 130， gp 130）表达显著下降（P＜0．05）。结论珍骨丸、骨刺风湿丸通过抑制gp130来抑制OC的骨吸收，并通过RANKL－RANK－OPG系统促进骨形成，增加骨密度达到治疗骨关节炎的作用。
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骨康对体外培养人成骨细胞OPG及RANKL基因表达的影响
[目的]观察中药骨康含药血清对肾阳虚型骨质疏松症患者成骨细胞细胞因子骨保护素(OPC)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL) mRNA表达的影响.[方法]取6月龄体质量2.5～3.0 kg的新西兰大耳白兔4只,雌雄各半,随机分为2组(中药骨康组、空白对照组),每组2只;分别灌服骨康煎剂4.2g·kg-1 ·d-1,以及等容积生理盐水,连续灌胃共7d,后1次灌胃2h后所有动物进行心脏采血,收集血清备用.分离并传代培养肾阳虚骨质疏松症患者成骨细胞,取第2代,制成2×105/mL的细胞悬液.实验组分别加入低、中、高不同浓度(体积分数5％、10％、20％)的骨康含药血清进行干预,空白对照组仅加培养液,继续培养.48 h后采用Trizol一步法提取总RNA,然后采用逆转录—聚合酶链反应( RT-PCR)法检测OPG、RANKL mRNA的表达.[结果]骨康低、中、高浓度组OPGmRNA表达量显著上升,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);骨康中浓度组与骨康低浓度组、骨康高浓度组与骨康中浓度组组间分别比较差异均有统计学意义(P＜0.05);骨康含药血清以体积分数5％、10％、20％浓度递增时,RANKLmRNA的表达量显著下降,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),骨康中浓度组与骨康低浓度组、骨康高浓度组与骨康低浓度组组间RANKLmRNA表达量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).[结论]骨康可以上调肾阳虚骨质疏松症患者体外培养成骨细胞OPG mRNA的表达,下调RANKLmRNA的表达.
