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动态张应变下大鼠肌卫星细胞三维培养的形态学观察
目的探讨三维培养条件下动态张应变对大鼠骨骼肌卫星细胞形态学的影响.方法将牵张应变(10%应变、频率0.2 Hz,每小时加载10 min,共作用48 h)作用于大鼠骨骼肌卫星细胞-支架材料复合物.结果在动态张应变作用下,骨骼肌卫星细胞沿应力方向延伸,并见到肌小管形成;而未施加应力的骨骼肌卫星细胞在各个方向上都有突起,但未见到肌小管形成.结论动态张应变有利于肌纤维理想极性的形成,并有助于组织工程化骨骼肌的构建.
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两种不同来源成肌细胞存活率的比较研究
目的 测定和比较两种不同组织来源的骨骼肌成肌细胞的存活率,为组织工程化骨骼肌种子细胞的选择提供参考.方法 将两种不同组织来源的第3代成肌细胞接种到24孔板和96孔板中,在1、3、5、7、9 d将两种组织来源的成肌细胞分别从24孔板中随机取出5个孔和从96孔板中随机取出10个孔的细胞.将从24孔板取出的细胞置于细胞活力分析仪行细胞存活率的测定.将从96孔板取出的细胞采用MTT法检测细胞增殖活力,测吸光值(OD).采用细胞存活率的平均值和OD值绘制细胞生长曲线,了解细胞生长情况.结果 从骨骼肌中培养的成肌细胞,MTT法测得7 d的OD值高,为0.815 3;细胞活力分析仪测定的细胞存活率7 d时也高,为92.06%.采用骨髓间充质干细胞经5-Aza诱导所得到的成肌细胞,MTT法测得7d的OD值高,为0.635 8;细胞活力分析仪测定的细胞存活率7 d时也高,为67.77%.从骨骼肌中培养的成肌细胞的存活率高于骨髓间充质干细胞经5-Aza诱导所得到的成肌细胞存活率(P<0.05).结论 从骨骼肌来源的成肌细胞更适合作为组织工程化骨骼肌的种子细胞.