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长片段非编码RNA XIST可改变人鼻咽癌HNE1细胞对顺铂的耐药性
目的 明确长片段非编码RNA(lncRNA)X失活特异性转录本(XIST)对人鼻咽癌细胞顺铂(DDP)耐药性的影响及可能的机制.方法 通过荧光定量PCR检测人鼻咽癌顺铂耐药HNE1细胞株(HNE1/DDP)中XIST的表达特征.采用MTT试验观察XIST上调和下调对HNE1/DDP细胞DDP耐药性的影响,并通过EdU试验和流式细胞技术观察其对HNE1/DDP细胞增殖和凋亡的影响.采用蛋白质印迹法检测XIST上调和下调对促凋亡因子程序性细胞死亡4(PDCD4)和Fas配体(Fas-L)蛋白表达的影响.结果 XIST在HNE1/DDP细胞的表达量显著高于HNE1细胞(0.57±0.06 vs 0.1±0.02,P<0.05).下调XIST的表达显著降低HNE1/DDP细胞对DDP的耐药性(P<0.05),而上调XIST增加对DDP的耐药性(P<0.05).下调XIST的表达显著降低HNE1/DDP细胞增殖(6.17±1.93 vs 16.594.86,P<0.05)并诱导细胞凋亡[(18.04±4.72)％vs(4.22±1.65)％,P<0.05],而上调XIST增加细胞增殖(25.40±7.21 vs 13.16±3.95,P<0.05)并抑制细胞凋亡[(2.82±0.88)％vs(6.46±1.75)％,P<0.05].下调XIST的表达显著增加HNE1/DDP细胞中PDCD4(4.10±0.42 vs 1.0±0.12,P<0.05和Fas-L(3.070.29 vs 1.0±0.14,P<0.05)蛋白的表达,而上调XIST降低PDCD4(0.36±0.11 vs 1.0±0.18,P<0.05)和Fas-L(0.17±0.09 vs 1.0±0.21,P<0.05)蛋白的表达.结论 XIST在HNE1/DDP细胞中表达升高,下调和上调XIST的表达可分别降低和增加HNE1/DDP细胞对DDP的耐药性,其机制可能与PDCD4和Fas-L蛋白表达改变相关.
关键词： X失活特异性转录本 顺铂 人鼻咽癌顺铂耐药HNE1细胞株 耐药性 蛋白
