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人参皂苷Rg3对膀胱癌细胞血管生成相关蛋白的表达及癌细胞生长和转移的影响
目的 探讨人参皂苷Rg3对表皮生长因子受体酪氨酸蛋白激酶(EGFR-TPK)和DNA拓扑异构酶Ⅰ(DNA TOPI)的抑制作用,并阐明其对膀胱癌细胞增殖、侵袭和血管生成的抑制作用机制.方法 不同浓度人参皂苷Rg3加入到EGFR-TPK、DNA TOP Ⅰ和人膀胱癌细胞株S637中,用ELISA法研究人参皂苷Rg3对EGFR-TPK和DNA TOP Ⅰ的抑制作用;溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑(MTT)法测定人参皂苷Rg3对人膀胱癌细胞株S637细胞和人正常膀胱上皮细胞(SV-HUC-1)生长的抑制作用;Transwell法检测人参皂苷Rg3对S637细胞侵袭的抑制作用;酶标仪法检测人参皂苷Rg3对细胞凋亡蛋白Caspase-3活性的影响;Western blot法检测人参皂苷Rg3存在下,人膀胱癌细胞株S637中还氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、小窝蛋白-1(CAV-1)及干细胞标志物(SOX-2)的表达.结果 人参皂苷Rg3对EGFR-TPK和DNA TOP Ⅰ(半抑制率IC50分别为35.32±3.12和8.32±1.21 μmol·L-1)、S637细胞生长(半抑制率IC5o为35.11±2.32 μmol· L-1)都具有良好的抑制能力,但对于SV-HUC-1细胞,人参皂苷Rg3则表现了较低的毒性;人参皂苷Rg3与空白对照组比较能够诱导肿瘤细胞穿过滤膜的数量减少(P＜0.01);与空白对照组比较,人参皂苷Rg3能显著提高S637细胞中Caspase 3活性(P＜0.05);人参皂苷Rg3能够下调HIF-1α、COX-2、SOX-2及VEGF的表达,上调CAV-1的表达(P＜ 0.05,P＜ 0.01).结论 低毒性的人参皂苷Rg3通过多靶向的降低EGFR-TPK、DNA TOP Ⅰ活性和HIF-1 α、COX-2、SOX-2及VEGF的表达,上调CAV-1的表达和激活Caspase 3活性的方式,对膀胱肿瘤细胞的侵袭、增殖和血管生成产生抑制作用.
