首页 > 文献资料
-
肝癌高表达抗原MAGEC2 CTL表位肽的鉴定
目的:观察肝癌高表达抗原MAGEC2的改造表位是否有HLA-A2限制性抗肿瘤能力.方法:通过NetCTL 1.2、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分选取MAGEC2的HLA-A2限制性表位;替换MAGEC2抗原锚定位点氨基酸获得改造肽;结合力实验检测候选表位与T2细胞表面HLA-A2分子的结合能力,ELISPOT实验和胞内因子染色检测候选表位肽诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)分泌干扰素γ(IFN-γ)的能力,体外细胞毒实验检测诱导CTL的能力.结果:P248、P248-1Y、P356、P356-1Y、P356-2L和P356-1Y2L具有较好的结合力,且P248-1Y和P356-1Y2L等改造肽与HLA-A2的结合力高于原肽.胞内因子染色和ELISPOT实验结果显示,表位肽P248、P248-1Y、P356和P356-1Y2L诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力,且P248-1Y和P356-1Y2L诱导特异性T细胞免疫分泌的IFN-γ略高于原肽(P<0.05).细胞毒实验结果显示表位肽P248、P248-1Y、P356和P356-1Y2L对HepG2细胞均有一定的杀伤作用,且P248-1Y和P356-1Y2L特异性CTLs对HepG2细胞杀伤率高于原肽特异性CTLs(P<0.05).结论:MAGEC2抗原改造表位P248-1Y和P356-1Y2L分别与天然表位P248和P356相比有更高的HLA-A2分子亲和力,保留了原有的免疫原性,并且改造肽抗肿瘤免疫效应强于天然表位.P248-1Y和P356-1Y2L是优秀的MAGEC2抗原的HLA-A2限制性CTL候选表位,可以成为新的抗肿瘤多肽免疫治疗疫苗的候选表位.
-
癌-睾丸抗原MAGEC2 HLA-A3限制性细胞毒性T淋巴细胞表位的鉴定
目的:预测并初步鉴定HLA-A3超型限制性MAGEC2抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)表位肽,为基于超型表位的MAGEC2治疗提供实验基础及新的候选靶标.方法:通过BIMAS、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分来选取MAGEC2的HLA-A3限制性表位;结合力实验用于检测候选表位与T2A3细胞表面HLA-A3分子的结合能力,ELISPOT实验检测候选表位肽诱导的CTL分泌IFN-γ的能力,体外细胞毒实验检测侯选表位肽诱导的CTL杀伤靶细胞的能力.结果:表位肽P147、P167、P196、P229和P251具有较好的HLA-A3结合力.ELISPOT实验结果显示表位肽P167、P196和P251诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力.细胞毒实验结果显示表位肽P196和P251诱导的CTL对靶细胞有一定的杀伤作用(P<0.05或P<0.01).结论:P196和P251有更高的HLA-A3分子亲和力,保留了原有的免疫原性,是优秀的MAGEC2抗原的HLA-A3限制性CTL候选表位,可以成为新的抗肿瘤多肽免疫治疗疫苗的候选表位.
