您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
细胞重编程效率文献资料
-
Sp1过表达载体的构建以及过表达Sp1对IPS诱导效率的影响
目的 诱导多能干细胞(iPSCs)是通过基因转染技术诱发体细胞重编程为具有胚胎干细胞特性和功能的多能干细胞,在再生医学领域具有广阔的应用前景.然而,细胞重编程的效率非常低,探索其他安全、有效地增加iPSCs生成效率的方法显得尤为重要.基本转录因子Sp1在多种组织中广泛表达,参与几乎所有细胞功能,包括细胞增殖、凋亡、分化和新生物的转化.利用Gateway技术构建Sp1过表达载体,在细胞重编程过程中过表达Sp1蛋白,观察过表达Sp1对hiPSCs诱导效率的影响.方法 通过Gateway技术,构建出表达Sp1基因的载体质粒pFinal/PGK-puro-EF1α-Sp1-IRES-EGFP,将其与包装质粒共转染293FT细胞产生慢病毒,将该病毒加入到细胞重编程过程中过表达Sp1,通过碱性磷酸酶染色观察其对细胞重编程效率的影响.结果 表达载体包装出的病毒感染后的人成纤维细胞中Sp1蛋白水平提高.在重编程过程中,增加Sp1表达令hiPSCs的克隆形成率略有提高(P＜0.05).结论 成功构建表达Sp1基因的载体质粒pFina1/PGK-puro-EF1α-Sp1-IRES-EGFP.过表达Sp1能提高hiPSCs克隆形成率,但其增加效果并不显著.
