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肝细胞生长因子对TNF-α诱导肝细胞凋亡的保护作用及其机制的研究
目的:探讨肝细胞生长因子对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的肝细胞凋亡的保护作用以及可能的机制.方法:选择第3代人类肝细胞系(L02细胞),分成三组:Ⅰ组,正常L02细胞;Ⅱ组,10000u/ml TNF-α损伤L02细胞24h;Ⅲ组,重组肝细胞生长因子(r-hHGF,5ng/ml)与L02细胞共同孵育30min后加入10000u/mlTNF-α,24h后处理细胞.观察"Ladder"条带、细胞DNA断裂百分率和用Western blot印迹分析法检测HSP70和IkB-α的表达.结果:Ⅱ组DNA电泳出现典型的"梯状"条带,而Ⅲ组则未见明显的"梯状"条带.DNA断裂百分率Ⅱ组比Ⅰ组高(分别为17.12±4.02和5.05±1.67,P＜0.01),Ⅲ组比Ⅱ组低(分别为8.77±2.01和17.12±4.02,P＜0.01).重组肝细胞生长因子预处理后再用TNF-α损伤的L02细胞,1h即可检测到HSP 70的表达,且持续到48h.肝细胞生长因子还抑制了TNF-α引起的L02细胞IkB-α量的减少.结论:重组肝细胞生长因子可减轻TNF-α诱导的L02细胞凋亡,它通过诱导L02细胞HSP 70的表达和抑制IkB-α的降解达到减轻L02细胞的凋亡.
