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过氧化体增殖物激活型受体反应元件文献资料
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过氧化体增殖物激活型受体反应元件类似序列对细胞胆固醇外流的影响
目的过氧化体增殖物激活型受体是调节脂质代谢的关键固醇类核内受体家族,过氧化体增殖物激活型受体反应元件调控多种与脂质代谢相关的蛋白和酶类,包括细胞胆固醇转运相关蛋白.探讨过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物对细胞大胆固醇流出的影响.方法设计的掩蔽物序列以过氧化体增殖物激活型受体α对过氧化体增殖物激活型受体的结合为基础.掩蔽物Scrambled寡核苷酸序列为ACTTGATCCCGTTTCAACTC, 寡核苷酸为TAAGGGAATCAGCAAGAGGT.培养U937细胞通过5 mg/L lipofectin处理4 h,用0.1～1 μmol/L掩蔽物或1 μmol/L随机寡核苷酸转染.换培养基后加HDL或过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂ciglitizone处理24 h.结果过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物寡核苷酸经质脂体介导转染细胞后可以抑制过氧化体增殖物激活型受体γ的促细胞胆固醇流出作用.由于所设计的过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物无过氧化体增殖物激活型受体型特异性,因此,掩蔽物寡核苷酸产生的效应是各亚型过氧化体增殖物激活型受体在细胞内调控基因表达的综合效应.过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物寡核苷酸的净效应是使细胞胆固醇流出效率降低.结论三种过氧化体增殖物激活型受体亚型可能都参与细胞胆固醇的转运,过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂ciglitizone的促细胞胆固醇流出作用被过氧化体增殖物激活型受体反应元件掩蔽物处理部分抑制.
