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人β2-微球蛋白文献资料
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人β2-微球蛋白的可溶性表达和纯化鉴定
目的:制备高纯度人β2-微球蛋白(β2m),为其结构和功能研究奠定基础.方法:选用两种不同的表达载体pET15b和pET21b,表达人β2m;联合使用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、高压液相色谱等方法,纯化人β2m;采用SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS质谱方法,鉴定人β2m.结果:使用改造过的N端组氨酸标签载体pET15b,在原核表达菌株E.coli2 BL21 (DE3)中,实现了人β2m稳定高效的可溶性表达;联合多种分离纯化方法,获得了色谱纯的人β2m,纯度达99％以上,质谱鉴定正确.结论:实现了人β2m的可溶性表达和制备,为进一步研究MHC Ⅰ类分子的结构和在免疫系统中的重要作用奠定基础.
关键词： 人β2-微球蛋白 表达载体 色谱 MALDI-TOF-MS
