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  • miRNA-199a-5p对骨肉瘤细胞增殖及自噬的影响

    作者:刘念;张红;薛中柱

    目的 探讨miRNA-199a-5p对人骨肉瘤细胞株U2OS增殖及自噬的影响及其可能的作用机制.方法 实时定量PCR法检测32例骨肉瘤患者的病理组织标本及配对癌旁正常组织中miRNA-199a-5p的表达水平.将miRNA-199a-5pmimics转染入U2OS细胞,使其过表达miRNA-199a-5p,采用CCK-8法和流式细胞仪检测细胞增殖及周期的变化;Western blot检测周期相关蛋白(cyclinD1、P27、pRb)及自噬相关蛋白(Beclin 1、LC3Ⅱ/Ⅰ)表达水平.结果 miRNA-199a-5p在骨肉瘤组织及癌细胞U2OS中低表达,且表达水平与肿块大小、远距转移、Enneking临床分期及病理分级密切相关.过表达miRNA-199a-5p后,U2OS细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),同时cyclinD1、pRb表达水平显著下降,而P27、LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1的表达水平显著增加(P<0.05).结论 miRNA-199a-5p能够抑制人骨肉瘤细胞株U2OS的增殖并激活细胞自噬;其作用机制可能与下调cyclinD1、上调P27、抑制pRb蛋白的磷酸化、造成细胞周期G1/S阻滞有关.提示miRNA-199a-5p可以作为骨肉瘤临床治疗的潜在作用位点.

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