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基因转染表达小鼠白细胞介素-33及其抗肿瘤机制研究
目的 建立分泌小鼠白细胞介素-33(IL-33)的基因转染细胞株,分析其特性并探讨IL-33在肿瘤微环境中的抗肿瘤作用.方法 构建含有人CD8信号肽基因序列的IL-33融合基因,经BamH I和EcoR I双酶切后插入pCDEF3真核表达载体构建成为pCDEF3-IL-33重组子,采用脂质体法以重组质粒pCDEF3-IL-33和空质粒pCDEF3分别转染小鼠乳腺癌细胞株4T1,经G418长期加压筛选后,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测基因转染细胞株培养上清中小鼠IL-33的分泌和IL-33体外对效应性CD8+T细胞干扰素(IFN)-γ的分泌;活细胞计数和羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)掺入法检测基因转染细胞生长与增殖的均一性.结果 基因转染细胞4T1-pCDEF3-IL-33能稳定分泌小鼠IL-33分子,其培养上清中的表达量为28 μg/L;与4T1及转染了空质粒pCDEF3的4T1-vec比较,其生长和增殖差异无统计学意义(P＞0.05);体外刺激试验表明,IL-33能显著地促进效应性CD8+T细胞分泌IFN-γ,对照组为125 μg/L,实验组为300μg/L,差异有统计学意义(P＜0.05);体内实验研究表明,分泌于肿瘤微环境中的IL-33能显著抑制肿瘤的生长和转移,第30天时肿瘤直径对照组为(18.0±2.5) mm,实验组为(6.5±0.9)mm,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 建立了稳定分泌小鼠IL-33的基因转染细胞株,微环境中的IL-33对肿瘤具有显著的抑制作用.
关键词： 白细胞介素-33 肿瘤微环境 效应性CD8+T细胞 干扰素 肿瘤生长与转移 -
HBV相关急性肝损伤与T细胞免疫
乙型肝炎病毒(HBV)感染在我国一直呈高流行性,HBV相关急性肝损伤是我国肝衰竭的主要类别.T细胞是适用性免疫系统的主要组成部分,在HBV相关急性肝损伤病理进程中发挥着不可或缺的关键作用.但由于T细胞的高度异质性及HBV感染自然史中对宿主免疫系统的影响复杂.因此当前我们对HBV感染与T细胞免疫参与的急性肝损伤病理过程的认识并不透彻.该文从HBV感染的生物学过程及T细胞亚群功能特点初步探讨二者参与急性肝损伤的变化特点及可能机制.
关键词： HBV感染 效应性CD8+T细胞 急性肝损伤 Treg细胞
