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Yin Yang1在分化甲状腺癌中的表达
目的 观察Yin Yang 1(YY1)在分化甲状腺癌中的表达,探讨YY1表达与临床特征的关系.方法 使用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测YY1基因在人甲状腺癌细胞株、甲状腺正常/肿瘤组织中的表达;采用Western blot和免疫组织化学染色技术分析YY1蛋白在人甲状腺癌细胞株、甲状腺正常/肿瘤组织中的表达量.结果 在转录水平和蛋白水平,甲状腺癌细胞株中均存在YY1过表达;在甲状腺癌组织中,YY1 mRNA的水平也是明显增加的.此外,免疫组织化学分析表明乳头状甲状腺癌(PTC)和滤泡性甲状腺癌(FTC)中YY1的表达水平明显增加48％和19％.通过YY1蛋白的分层分析,88％ PTC患者中出现了YY1的阳性表达.YY1的表达与PTC和FTC患者的临床病理特征的相关性表明,YY1的表达与诊断时的年龄密切相关.结论 YY1过表达于分化甲状腺癌中,且更频繁地过表达于PTC亚型中.
关键词： Yin Yang 1 甲状腺癌 -
核转录因子YY1对缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制
目的 探讨核转录因子阴阳1 (yin yang 1,YY1)对体外缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制.方法 体外分离培养新生大鼠心肌细胞,利用无糖培养基及含95％ N2+5％ CO2混合气体的缺氧装置(Billups-rothenberg)诱导建立缺血缺氧心肌细胞凋亡模型,通过建立过表达YY1重组质粒并将其转染入心肌细胞内,观察YY1对缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡的影响.实验分为对照组、YY1组、缺血缺氧组、缺血缺氧+YY1组、缺血缺氧+LY294002组、缺血缺氧+YY1+LY294002等6组(n=4).CCK-8法检测各组心肌细胞活力,TUNEL法检测各组心肌细胞凋亡情况,fQT-PCR检测YY1 mRNA表达水平,Westem blot法检测YY1、磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶(p-Aktser473)及生存素(Survivin)蛋白表达水平.结果 与对照组相比,缺血缺氧组在缺血缺氧刺激6h后心肌细胞活力下降、凋亡率明显增高[(0.55 ±0.02) vs (1.14±0.02)、(38.25 ±1.65)％ vs (1.38±0.15)％,P＜0.01].缺血缺氧前预转染YY1重组质粒后,与缺血缺氧组相比,缺血缺氧+YY1组心肌细胞活力上升、凋亡率降低、p-Aktser473和Survivin蛋白表达增加[(0.78 ±0.03) vs (0.55 ±0.02)、(14.50±1.56)％ vs (38.25±1.65)％、p-Aktser473相对灰度值:(0.82±0.03) vs (0.28 ±0.03)、Survivin相对灰度值:(0.93 ±0.02) vs (0.36±0.02),P＜0.01].经PI3K/Akt信号通路特异性抑制剂LY294002干预后,缺血缺氧+ YY1+LY294002组与缺血缺氧+YY1组相比,心肌细胞活力下降、凋亡率增加、p-Aktser473和Survivin蛋白表达显著降低[(0.62 ±0.02) vs (0.78 ±0.03)、(27.75±1.12)％vs (14.50±1.56)％,p-Aktser473相对灰度值:(0.43 ±0.02)vs(0.82±0.03),Survivin相对灰度值:(0.27 ±0.02) vs (0.93 ±0.02),P＜0.01].结论 核转录因子YY1可抑制缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡,且该作用与PI3K/Akt信号通路的激活相关.
关键词： 心肌细胞 细胞凋亡 Yin Yang 1 缺血缺氧 PI3K/Akt信号通路
