首页 > 文献资料
-
EIAV env基因在痘苗病毒中的表达及其免疫效果的观察
将马传贫驴白细胞弱毒疫苗及其亲本株env基因克隆到痘苗病毒表达载体pSC65的pE/L启动子下游,通过同源重组插入到痘苗病毒天坛株基因组TK区,经蓝白斑筛选获得重组痘苗病毒rvv-DLVenv和rvv-LNenv,Western blot检测目的蛋白的表达,结果表明重组痘苗病毒能够有效表达完整的EIAV Env蛋白,其肌肉接种免疫小鼠后,表达的目的蛋白具有良好的免疫原性,能够诱导机体产生有效的体液和细胞免疫应答,其中以细胞免疫效果更为显著,CTL特异性裂解高可达28%.本研究为EIAV基因工程疫苗的开发研制奠定了基础.
关键词: EIAV Env蛋白 重组痘苗病毒 免疫应答 -
重组杆状病毒表达的EIAV Env蛋白与含有env基因重组痘苗病毒的联合免疫
目的:构建新型的马传染性贫血病毒(EIAV)的候选疫苗.方法:利用BAC-To-BAC杆状病毒表达系统,将中国马传贫驴白细胞弱毒疫苗(EIAV DLV)及其亲本株(EIAV LN)env基因导入到杆状病毒基因组中.转染昆虫细胞后,得到的重组病毒用SDS-PAGE和Western blot检测表达产物.以本实验室构建的含有EIAV env基因的重组痘苗病毒,单独或与重组杆状病毒表达的EIAV Env蛋白联合免疫小鼠.结果:构建的重组杆状病毒能正确表达全长Env蛋白.与单独免疫组相比,联合免疫组免疫应答显著增强,其中中和抗体的滴度提高5~9倍.结论:含有EIAV env基因的重组痘苗病毒与Env蛋白抗原联合免疫,能够诱导高滴度的中和抗体.
关键词: EIAV Env蛋白 重组杆状病毒 重组痘苗病毒 免疫应答