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跨胎盘RNAi文献资料
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跨胎盘RNAi技术对目的基因下调的研究
目的:利用跨胎盘RNA干扰技术下调目的基因,研究小鼠胚胎发育中BMP4基因的功能。方法实验分为Ringer’ s液空白对照组(空白组)、 pSES阴性对照组(阴性组)、 pSES?SiBMP4实验组(实验组),各组孕7.5 d母鼠尾静脉注射干预。分别对干预溶液体积、质粒浓度、注射速度进行研究。[依据小鼠克数体重体积分别采用5、10、15及20μl/g;浓度采用10、30、50及70 ng/μl;注射时间3、5、10、20及30 s。]探索获得基因下调胚胎鼠的适参数,并观察干预48 h后胚胎基因型及表现型。结果实验组孕鼠在10μl/g,50 ng/μl,5 s给药后荧光强度下调明显,与阴性组、空白组比较干预48 h后胚胎存在中枢神经系统、心血管系统异常,实验组胚胎 BMP4及 Smad4基因 mRNA 下调。结论优化的跨胎盘RNAi技术可用于小鼠基因功能的研究。