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广西眼镜蛇文献资料
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广西眼镜蛇毒中Natrin的克隆及在E.coli中的表达
目的 采用基因工程技术,在大肠杆菌中表达广西眼镜蛇毒中Natrin成熟蛋白.方法 将来源于广西眼镜蛇毒的Natrin蛋白的基因克隆至融合表达载体pMAL - c2x中,以N端融合了麦芽糖结合蛋白的形式在大肠杆菌BL21( DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达Natrin蛋白.超声破菌后,将上清液经Amylose树脂柱上纯化后,收集并冻干Natrin融合蛋白,利用蛋白印迹分析其是否有Natrin抗原活性.结果 经蛋白印迹分析可知在50 kD处的条带具有Natrin抗原活性.结论 在大肠杆菌中可以表达出Natrin蛋白.
