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白花蛇舌草水提物对白血病CEM细胞抑制作用及机制研究
目的 研究白花蛇舌草对CEM细胞抑制作用及机制.方法 以不同浓度的白花蛇舌草水提物作用CEM细胞24,48,72h后,通过MTT比色试验,检测其对CEM细胞的抑制率;用浓度分别为166μg/ml、33.2μg/ml、6.64μg/ml的白花蛇舌草水提物作用于CEM细胞24,48,72h后,通过逆转录PCR(RT-PCR)检测P53基因的表达,探索白花蛇舌草抑制CEM细胞的可能机制.结果 白花蛇舌草水提物能够抑制CEM细胞的生长;白花蛇舌草能促进CEM细胞的P53基因表达,且随用药浓度的升高及作用时间的延长,其抑制作用逐渐增强、P53基因表达也逐渐增强.结论 白花蛇舌草水提物能抑制白血病CEM细胞的生长,其作用强度与时间、浓度呈正相关,其抑制机制可能与上调P53基因的表达有较大关联.
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白花蛇舌草诱导白血病CEM细胞凋亡作用的机制研究
目的 研究白花蛇舌草体外诱导白血病CEM细胞凋亡的可能机制.方法 以不同浓度(166,33.2,6.64 μg/ml)的白花蛇舌草水提液作用于CEM细胞24,48,72h后,通过逆转录PCR(RT-PCR)检测Bcl-2、Bax基因的表达,探索白花蛇舌草诱导CEM细胞凋亡的可能机制.结果 白花蛇舌草能抑制CEM细胞的Bcl-2基因表达,且随用药浓度的升高及作用时间的延长,其抑制作用逐渐增强;同时白花蛇舌草能促进Bax基因表达,并与用药浓度的加大及作用时间的延长呈正比关系.结论 白花蛇舌草水提物诱导白血病CEM细胞凋亡与下调Bcl-2基因、上调Bax基因的表达,使Bcl-2/Bax比值下降有较大关联.
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survivin基因在地塞米松诱导CEM细胞凋亡过程中的变化
目的糖皮质激素诱导白血病细胞凋亡的确切机制尚不清楚.存活素(survivin)是凋亡抑制蛋白(inhibitors of apoptosis protein,IAPs)家族的成员,与凋亡抑制、肿瘤细胞增殖、血管形成及耐药正相关.该研究探讨地塞米松诱导急性淋巴白血病细胞系CEM凋亡过程中survivin基因的表达.方法将在体外培养的对数生长期的CEM细胞浓度调至2×105个/mL,接种于24孔培养板中,用终浓度分别为0.1,0.5,1,5,10 μM地塞米松处理,以不加任何药物的CEM细胞作为对照组,培养后24,48,72 h取样.台盼蓝拒染法测定细胞活力,流式细胞仪解析地塞米松诱导CEM细胞凋亡,Western Blot、RT-PCR方法分别检测survivin蛋白和基因的表达.结果0.1,0.5,1,5,10 μM地塞米松于48 h开始明显抑制CEM细胞的生长,抑制效果呈时间、剂量依赖方式.随着地塞米松剂量增大,凋亡细胞比例逐渐增加.5μM地塞米松处理12～48 h,凋亡细胞比例从14.9%升至46.2%.5 μM地塞米松处理降低了survivin蛋白表达,12 h降至对照组的54.6%,24 h降至45.5%,48 h降至15.8%,72 h降至9.7%.survivin mRNA表达在5 μM地塞米松处理后也被下调,处理后6 h降至对照组的76.4%,12 h降至67.3%,24 h降至55.0%,36 h降至49.9%,48 h降至38.3%,72 h降至18.3%.结论地塞米松诱导CEM细胞凋亡与下调survivin基因表达有关.
