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  • 人DR5真核表达载体的构建及稳定转染NS-1细胞系的建立

    作者:刘峰涛;李淑莲;马远方

    目的:构建人死亡受体5(DR5)真核表达载体,转染NS-1细胞,建立稳定转染的NS-1细胞系. 方法:采用RT-PCR方法,以人Jurkat细胞cDNA为模板扩增人DR5基因的cDNA编码区序列, 利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.0, 经酶切和测序鉴定后, 用脂质体转染法转染NS-1细胞, 通过G418筛选, 建立稳定转染的NS-1细胞系, 用FACS法检测DR5的表达. 结果:成功构建了pcDNA3. 0/DR5真核表达载体, 并建立了稳定转染的NS-1细胞系, 成功地表达目的基因. 结论:真核表达载体成功构建和稳定转染NS-1细胞系的建立为进一步进行基因治疗研究奠定良好的实验基础.

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