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  • 22R序列loop和泡突变对GFP报告基因表达的作用

    作者:王红钢;王予东

    目的:我们研究室的前期工作在猴空泡病毒40(SV40)早期mRNA PolyA序列(SV40PolyA)中发现1个活化基因的原件22R(5' -GTGAAAAAAATGCTTTATTTGT-3'),该片段可以解除Alu串连序列(或Line-1重复序列)对GFP报告基因的抑制作用.我们研究22R突变对GFP报告基因表达的作用.方法:将22R及其突变片段插入pEGFP-C1质粒,构建表达载体,瞬时转染HeLa细胞,荧光显微镜下计数观察GFP荧光阳性细胞数.结果:AAG、AGA、TGT、TTG和TGC(22R,野生型)5个质粒促进基因表达作用比较明显.VECT、VEGT、VETA、VETC、VETG和VETT明显促进GFP基因表达.结论:22R loop和泡的突变对其活化GFP报告基因作用有重要影响.

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