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5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶文献资料
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杜氏盐藻RbcS基因cDNA片段的克隆和序列分析
目的:克隆杜氏盐藻1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)小亚基RbcS cDNA片段.方法:根据莱茵衣藻、团藻、玉米等真核生物的RuBisCO小亚基RbcS氨基酸的高度保守序列ETRSYLPP和MNKLPMFG,设计一对简并引物,采用RT-PCR方法及该简并引物克隆杜氏盐藻RbcS cDNA.PCR产物经T-A克隆与T-vector相连,转化大肠杆菌JM109,随机挑取数个菌落,筛选鉴定,对阳性克隆进行测序分析.将测序结果推导成氨基酸序列进行同源性比较.结果:得到的cDNA长度为209 bp,编码69个氨基酸.推导的氨基酸序列与团藻、Chloromonas sp.ANT3、衣藻、伞藻、菠菜、玉米的RbcS相比较,同源性分别为85%、84%、82%、76%、70%、69%.结论:所克隆的序列为杜氏盐藻RbcS cDNA片段.
关键词： 杜氏盐藻 1 5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶 RbcS 简并引物
