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健脾祛瘀法对血脂异常ApoE基因缺失小鼠视网膜和Bruch膜的影响
背景 血脂异常是年龄相关性黄斑变性(AMD)的发病因素之一,AMD的治疗方法一直是研究的热点. 目的 观察健脾祛瘀中药制剂对血脂异常ApoE基因缺失(ApoE-/-)小鼠视网膜和Bruch膜的治疗作用.方法 采用随机数字表法根据小鼠体质量分层随机分组.将36只2月龄ApoE-/-小鼠分为普通饮食组、高脂模型组及健脾祛瘀治疗组,每组12只.高脂模型组及健脾祛瘀治疗组小鼠均用高脂饲料喂养4个月,健脾祛瘀治疗组小鼠于6月龄开始给予健脾祛瘀制剂灌胃,每次0.3ml,每日2次,持续1个月；普通饮食组和高脂模型组小鼠同时间点开始用等量生理盐水灌胃,从6月龄开始3个组均给予普通饲料喂养.于小鼠7月龄时抽取股静脉血检测各组小鼠血浆总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和血浆甘油三脂(TG)浓度,抽血后以过量麻醉法处死,制备视网膜组织切片并行Masson染色,光学显微镜和透射电子显微镜下观察视网膜和Bruch膜的组织形态学改变.采用Mias 2000型图像分析系统半定量检测各组小鼠视网膜外核层细胞、视网膜色素上皮(RPE)层细胞数及Bruch膜厚度.结果 7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠TC、LDL和TG浓度分别为(6.47±0.49)、(1.46±0.10)、(0.62±0.21) mmol/L,比同龄高脂模型组小鼠的(10.53±0.30)、(1.90±0.13) mmol/L和(1.15±0.29) mmol/L以及普通饮食组小鼠的(9.63±0.18) mmol/L、(1.12±0.15)、(0.88±0.21) mmol/L均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05～0.01).7月龄高脂模型组小鼠及同龄普通饮食组小鼠外核层和RPE层细胞排列紊乱,细胞萎缩明显,Bruch膜纤维分叉,高脂模型组部分小鼠可见玻璃膜疣；而同龄健脾祛瘀治疗组小鼠外核层和RPE层细胞排列较整齐,细胞萎缩减轻,Bruch膜纤维未见分叉,未见玻璃膜疣.7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠外核层和RPE层细胞数分别为(23 124.00±755.18)个及(10.75±0.59)个,比同龄高脂模型组小鼠的(19 107.00±1436.82)个和(8.55±1.11)个以及普通饮食组的(21 663.00±1073.27)个和(9.75±0.58)个明显增多,差异均有统计学意义(P＜0.05).7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠Bruch膜厚度为(0.89±0.05) μm,明显比高脂模型组小鼠的(1.02±0.13)μm薄,差异有统计学意义(P＜0.01).7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠RPE、Bruch膜组织的超微结构形态明显改善. 结论 健脾祛瘀中药制剂可降低血脂异常ApoE-/-小鼠的高脂血症,改善视网膜外核层、RPE层、Bruch膜的组织结构形态.
