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miR-148文献资料
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miR-148a 靶向DNA甲基转移酶1对 ATP结合盒转运体 G1基因甲基化的调节
目的 探讨微小RNA(miR-148a)在巨噬细胞中能否靶向DNA甲基转移酶1(DNMT1)从而调节ATP结合盒转运体G1(ABCG1)的甲基化水平.方法 运用生物信息学网站预测DNMT1是miR-148a靶基因,利用双萤光素酶报告基因系统验证miR-148a能否与DNMT1 (3'UTR)特异性结合;将miR-148a模拟物转染至THP-1源性巨噬细胞,运用实时荧光定量PCR技术检测DNMT1的mRNA水平,运用Western Blot技术检测DNMT1蛋白表达水平;运用焦磷酸测序技术观察miR-148a能否在巨噬细胞中影响ABCG1甲基化水平.结果 miR-148a能显著降低pmirGLO-DNMT1载体上的萤火虫萤光素酶活性;miR-148a在巨噬细胞中不能降低DNMT1的mRNA水平,但可以降低DNMT1的蛋白质水平,上述差异均有统计学意义(P＜0.05);焦磷酸测序发现在THP-1源性巨噬细胞miR-148a未影响ABCG1的甲基化水平.结论 miR-148a可以与DNMT1(3'UTR)特异性结合并且阻遏DNMT1蛋白质合成,但是在巨噬细胞中不能通过改变DNMT1的蛋白水平而影响ABCG1甲基化水平.
关键词： miR-148 DNA甲基转移酶1 甲基化 THP-1源性巨噬细胞
