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流式微球分析技术应用于小鼠血清免疫球蛋白同种型的检测研究
目的:建立流式微球分析技术鉴定免疫球蛋白同种型的方法,为其应用于单克隆抗体制备提供参考.方法:采用绵羊红细胞致敏小鼠产生相应抗体,利用Mouse ImmunoglobulinIsotyping CBA Kit检测血清中免疫球蛋白同种型及κ、λ轻链的表达.结果:阴性对照显示所有免疫球蛋白同种型检测阴性;标准样品1显示IgG1λ,IgG2bλ,IgAλ和IgG1κ,gG2b κ,IgAκ,IgEκ阳性,标准样品2显示IgG2aλ,IgG3λ,IgMλ和IgG2aκ,IgG3 κ,IgM κ阳性;与标准一致.原血清检测显示所有免疫球蛋白同种型均阴性;血清1:10~1:100000稀释后检测结果显示IgMλ链及IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3,IgA,IgM κ链随稀释倍数不同有不同的表达.血清在1:1000~1:10000稀释范围检测结果较一致,其中又以1:5000为佳检测浓度.而血清1:100稀释后虽然κ链的表达均能检测到,但与表达的水平不相关;血清1:100000稀释后只检测到IgG1,IgG2bκ链的表达.结论:CBA方法分析免疫球蛋白同种型属于定性检测,方法灵敏、简便快速且便于大量检测,是目前鉴定免疫球蛋白同种型的较优方法.