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小鼠糖尿病肾病足细胞NOD2mRNA表达变化及其意义
目的:观察糖尿病肾病(DKD)小鼠足细胞中细胞核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(NOD2)mRNA 的表达变化,并探讨其意义。方法将分化完全的小鼠足细胞接种至6孔板,分为 DKD 组和 NC 组。DKD 组分别加入25、50 mmol/L 的膜过滤葡萄糖溶液刺激24 h 制备 DKD 足细胞模型;NC 组不给予糖刺激。采用实时荧光定量PCR 法检测两组细胞中的 NOD2 mRNA。选取上一实验中筛选出的适浓度葡萄糖刺激足细胞制作 DKD 模型,分为胞壁酰二肽(MDP)组、shRNA 组和模型组。MDP 组给予2 g/mL 的 MDP 刺激,shRNA 组转染 NOD2 shRNA,模型组常规培养,24 h 后采用实时荧光定量 PCR 法检测各组细胞中的 NOD2、nephrin、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA。结果 DKD 组细胞中 NOD2 mRNA 相对表达量高于 NC 组,DKD 组中50 mmol/L 亚组 NOD2 mRNA 相对表达量高于25 mmol/L 亚组(P 均<0.05)。MDP 组细胞中 NOD2、TNF-αmRNA 相对表达量高于模型组,nephrin mRNA 相对表达量低于模型组(P 均<0.05);shRNA 组细胞中 NOD2、TNF-αmRNA 相对表达量低于模型组,nephrin mRNA 相对表达量高于模型组(P 均<0.05)。结论 DKD 小鼠足细胞中 NOD2 mRNA 表达上调,NOD2 mRNA 高表达时足细胞损伤加重,NOD2 mRNA 低表达时足细胞损伤减轻;NOD2 mRNA 表达变化可能与 DKD 的发病及病情进展有关。