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microRNA:RNA干扰文献资料
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AKT靶向miRNA表达载体的构建及其对胃癌细胞增殖侵袭的影响
目的 构建靶向AKT基因的miRNA真核表达载体,观察其转染胃癌BGC-823细胞后对胃癌细胞增殖及侵袭的影响.方法 设计并合成两条针对AKT基因的特异性miRNA干扰序列,与载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR连接,转化大肠杆菌,纯化并鉴定后转染BGC-823细胞,实时定量PCR及Western blot技术鉴定重组体对AKT基因表达的干扰效果.使用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞的侵袭能力.结果 针对AKT基因的miRNA干扰质粒构建成功,BGC-823细胞转染该质粒后AKT mRNA及AKT蛋白表达明显受抑制,细胞增殖和侵袭能力均显著下降(P均＜0.05).结论 AKT靶向miRNA真核表达载体构建成功；其可有效抑制胃癌细胞的增殖和侵袭能力.
关键词： AKT基因 microRNA:RNA干扰 增殖 侵袭
