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唾液结合区段文献资料
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变形链球菌亚单位疫苗SBR制备及经颌下腺免疫小鼠的抗体应答
目的:探讨变形链球菌(S.mutans)唾液结合区段(SBR)作为亚单位防龋疫苗的免疫原性,并评价经涎腺接种诱导有效免疫应答的可行性.方法:构建含S.mutans SBR基因的重组原核表达质粒pTriEx4-SBR,用该质粒转化大肠杆菌(E.coli)JM109(DE3),培养转化后的E.coli并诱导其表达SBR蛋白;以SBR蛋白作为亚单位防龋疫苗经颌下腺免疫BALB C小鼠,ELISA检测特异性抗体指标.结果:纯化得到的SBR蛋白与预期相符;ELISA结果表明,SBR蛋白经颌下腺免疫小鼠能够诱导血清抗SBR特异IgG(P＜0.01)、唾液抗SBR特异IgG(P＜0.01)、唾液抗SBR特异IgA(P＜0.01)显著应答.结论:本实验所表达及纯化的SBR蛋白经涎腺接种途径可诱导明显的免疫应答.
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变形链球菌SBR基因表达载体的构建和表达
目的:构建可用于大肠杆菌表达系统的含变形链球菌唾液结合区段(SBR)基因的表达载体.方法:采用定向克隆方法将变形链球菌唾液结合区段(SBR)基因插入表达载体pcMVT7,构建重组原核表达质粒pcMVT7-SBR,转化大肠杆菌JM109(DE3),IPTG诱导表达,亲和层析纯化目的蛋白.结果:经酶切鉴定及DNA序列测定,重组质粒pcMVT7-SBR序列及阅读框架正确,亲和层析纯化得到SBR融合蛋白.结论:SBR表达载体构建成功,为防龋疫苗的动物实验研究奠定基础.
