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抗CD40抗体增强宫颈癌肽疫苗的治疗作用
目的：探讨抗CD40抗体对宫颈癌肽疫苗治疗作用的影响。方法将乳头状病毒结构性蛋白 E7表位肽（ E749－57，H－2Db限制性，CD8 T细胞表位）与Toll样受体7配体（Gardiquimod）组成疫苗，C57BL／6小鼠给予疫苗及抗CD40抗体免疫后取得外周血及脾组织CD8 T细胞，利用流式细胞仪分析特异性CD8 T细胞数量，Elisa检测CD8 T细胞与TC－1细胞（表达HPV E7蛋白的小鼠宫颈癌细胞）共孵育后干扰素（ INF－γ）表达水平。另取15只皮下荷瘤小鼠，监测免疫后肿瘤生长速度。结果与单用疫苗组相比，抗 CD40抗体明显增加小鼠外周血肿瘤特异性 CD8 T细胞数量（16．50±0．8185％ vs 9．747±1．834％，P＝0．0282），且内源性CD8 T细胞体外与TC－1细胞共孵育可以分泌INF－γ，体内显著抑制皮下肿瘤生长（ P＜0．001）。结论抗CD40抗体增强肽疫苗诱发的免疫应答，有潜力成为一种良好的佐剂。
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CpG-ODN联合抗CD40抗体活化小鼠调节性B细胞抑制CD4+T细胞增殖
目的 分析CpG寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)联合抗CD40抗体刺激后的调节性B细胞(Breg)对其免疫调节功能的影响.方法 用流式细胞分选仪分选小鼠脾脏CD5+ CD1dhigh Breg与CD5-CD1dlowB细胞亚群,CpG-ODN联合抗CD40抗体激活24h,再与纯化的CD4+T细胞共培养,流式细胞术检测活化后的Breg及对照CD5-CD1dlowB细胞亚群白细胞介素10(IL-10)的表达,以及共培养抗CD3抗体联合抗CD28抗体激活的CD4+T细胞的增殖与γ干扰素(IFN-γ)的水平.结果 CpG-ODN联合抗CD40抗体激活的CD5+CD1dhighBreg亚群与CD4+T细胞共培养时能明显抑制活化的CD4+T细胞的增殖,同时IFN-γ的水平降低;而CpG-ODN联合抗CD40抗体刺激后的对照B细胞亚群则不能抑制CD4+T细胞的增殖与IFN-γ分泌.CD5+ CD1dhighBreg亚群在CpG-ODN联合抗CD40抗体刺激24h,IL-10的表达水平明显高于CD5-CD1dlowB细胞亚群.结论 体外CpG-ODN联合抗CD40抗体刺激后的CD5+ CD1dhighBreg亚群通过分泌IL-10抑制CD4+T细胞的活化.
