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  • 甲型副伤寒杆菌重组蛋白OmpW的表达与鉴定

    作者:林飞飞;冯康乐;雷银蕉;戎春浩;盛思;阮萍

    目的 构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompW的原核表达系统,确定其重组表达产物rOmpW免疫原性,了解甲型副伤寒杆菌临床菌株ompW基因携带率.方法 采用PCR和T-A克隆法从甲型副伤寒杆菌临床株JH01中获得ompW基因克隆并构建其原核表达系统,重组蛋白纯化后用SDS-PAGE及Western-Blotting分析.采用PCR检测95株甲型副伤寒杆菌临床菌株ompW基因携带率.结果 与报道的相关序列比较,所克隆的ompW基因核苷酸和氨基酸序列相似性均为100%.rOmpW免疫家兔可产生抗体并能与甲型副伤寒杆菌全菌抗血清产生阳性Western杂交信号.所有甲型副伤寒杆菌菌株均携带ompW基因.结论 构建甲型副伤寒杆菌外膜蛋白基因ompW的原核表达系统,证明了ompW是存在于甲型副伤寒杆菌的序列保守、分布广泛的外膜蛋白基因,为进一步研究该蛋白作为多价甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗候选抗原奠定基础.

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