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应用PCR和FISH方法诊断X-连锁隐性鱼鳞病3例
应用多聚酶链反应( PCR)和荧光原位杂交( FISH)方法对3例X-连锁隐性鱼鳞病( XLRI)患者进行分子诊断。对2个X-连锁隐性鱼鳞病家系3例患者及家族成员采集外周血标本后,先采用PCR扩增STS基因的两末端序列及侧翼的微卫星标记；再应用cDNA STS基因特异性探针对间期白细胞核进行 FISH 检测。选取 X 染色体上自 DXS1139至DXF22S1区域内7个微卫星标记进行PCR扩增以确定DNA缺失大小。 PCR检测STS基因两端序列结果没有扩增产物。FISH方法也证实了患者STS基因DNA序列存在缺失。应用多态性微卫星序列进行PCR扩增,结果表明患者存在X染色体上STS基因及其侧翼序列,自DXS1139至 DXF22S1区域内,DNA缺失达1．97 Mb。 PCR和FISH方法证实XLRI患者STS基因及其两侧翼序列DNA缺失,具有重要的遗传咨询意义。
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1个X-连锁鱼鳞病家系的基因突变鉴定与产前诊断
X-连锁鱼鳞病（XLI）是一种类固醇硫酸酯酶缺乏的代谢性疾病，常于出生时或生后不久发病，编码类固醇硫酸酯酶的基因（STS）位于X染色体短臂上，STS基因发生缺失或突变时可导致此病的发生。本研究收集一个家系的临床表型资料，其中先证者，男，足月顺产，11岁，全身皮肤干燥、粗糙、呈黑褐色鳞片状，主要累及腹部和肢体伸侧。采集家系中各成员的外周血提取DNA，采用多重连接依赖式探针扩增（MLPA）技术对家系各成员的X染色体上的STS基因拷贝数进行检测，用全基因组芯片进一步明确X染色体微缺失片段的大小，随后采用MLPA技术对先证者母亲再生育进行产前诊断。结果发现家系中先证者及2个患者均为STS缺失的男性半合子，基因芯片鉴定出Xp22.31存在缺失，缺失大小为1.6 Mb（chrX：6,516,735-8,131,442），另鉴定出2个女性家庭成员为携带者。先证者母亲再生育产前诊断结果证实胎儿为携带者。本研究表明该XLI家系存在STS基因缺失，该缺失引发出XLI特有的皮肤病变，MLPA是XLI分子诊断与产前诊断的便捷可靠技术。
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X性联锁遗传鱼鳞病一家系的STS基因研究
目的研究一X性联锁遗传鱼鳞病(XLI)家系基因突变,探讨基因突变与临床表现的关系,为进一步开展基因诊断和基因治疗奠定基础.方法应用PCR方法扩增家系中的先证者及其母亲及与该家系无关的50例正常人外周血基因组DNA STS基因的第一外显子和第十外显子.以角蛋白hHb6为引物,作内对照.结果家系中先证者的STS基因全部缺失,而先证者之母和与该家系无关的50例正常人未发现缺失.先证者及先证者之母的内对照引物PCR扩增后都有产物.结论该XLI家系存在STS基因缺失,该缺失引发出XLI特有的皮肤病变.
