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人PPARγ1LBD融合蛋白表达质粒的构建和诱导条件优化
目的 制备高纯度的人PPARγ1LBD融合蛋白,为筛选其配体奠定基础.方法 以人脂肪组织总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增出人PPARγ1LBD基因的cDNA片段,将其插入表达载体pMAL-p2X的麦芽糖结合蛋白(maltose binding protein,MBP)编码基因malE的下游,转化宿主菌E.coli.TB1.并对重组质粒在大肠杆菌TB1中的表达条件进行了优化.结果 经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切,获得分子量为909bpDNA条带;当诱导剂IPTG浓度为0.4 mmol·L-1,30℃振荡诱导培养6 h时,重组菌TB1高效表达MBP-PPARγ1LBD融合蛋白,表达量可达胞质总蛋白的38.54%.结论 成功构建了能在TB1中高效表达人PPARγ1LBD融合蛋白的重组质粒,获得了具有高生物活性的融合蛋白.
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PPARγ1甲基化与痰湿气虚体质围绝经期妇女腹型肥胖的关联研究
目的:探讨PPARγ1基因启动子区甲基化的表达与广西地区痰湿气虚体质围绝经期妇女腹型肥胖的相关性.方法:选取广西地区围绝经期妇女为研究对象,痰湿气虚体质的腹型肥胖妇女26人为实验组,体重指数正常的围绝经期妇女26人为对照组.检测总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、PPARγ1基因启动子CpG区甲基化水平.结果:两组体重指数、腰围有统计学差异(P<0.05);总胆固醇、高密度脂蛋、低密度脂蛋白无统计学差异(P>0.05);甘油三酯、甲基化程度有统计学差异(P<0.05).结论:痰湿气虚体质围绝经期妇女腹型肥胖的发病危险因素与PPARγ1甲基化程度可能有关.