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反义寡聚硫代磷酸脱氧核糖核苷酸文献资料
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反义寡聚硫代磷酸脱氧核糖核苷酸的抗巨细胞病毒作用
目的研究互补于CMV主要即刻早期 (MIE) mRNA的起始密码子位点和MIE mRNA前体内含子1/外显子2拼接位点的2个19个碱基的AS S-ODN (AS1和AS2)对CMV复制的抑制作用.方法采用原位ELISA法测定2BS细胞上CMV抗原量.结果 2个S-ODN均有抗CMV作用,半数有效浓度 (EC50) 分别为4.53和10.2 μmol*L-1.8.0 μmol*L-1的AS1使CMV抗原分泌推迟3～4 d.感染后立即加药效果好,12 h后加药效果大大下降 (P<0.05),感染后36 h再添加同一剂量及与DHPG联合使用效果明显增强(P<0.05).2种AS S-ODN 64.0 μmol*L-1时仅有轻微的细胞毒性,16.0 μmol*L-1以下浓度无明显毒副作用.采用5 mg*L-1的脂质体使2种S-ODN的EC50分别降低了111.0和151.7倍.2种正义序列对照也显示出抑制效应,EC50分别为26.2和30.1 μmol*L-1.Northern Blot分析提示激活RNA酶H降解杂交双链中的mRNA分子为重要的特异性作用机制, 而干扰CMV对细胞的吸附与侵入为重要的非特异性作用机制.结论作用于MIE基因的AS S-ODN可有效地抑制CMV复制,值得进一步研究以应用于治疗CMV感染.
关键词： 反义寡聚硫代磷酸脱氧核糖核苷酸 巨细胞病毒 抗病毒剂
