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钙非依赖磷脂酶A2与心肌缺血再灌注关系的研究进展
钙非依赖磷脂酶A2 (iPLA2)是磷脂酶A2(PLA2)家族的一大亚族,在信号转导与磷脂重构等方面发挥重要的作用.从1900年研究胰液和蛇毒中的PLA2开始到现在已过百年,但它在生理过程中的一些重要作用直到近20年才被逐渐认识,而近15年来,越来越多的研究表明,在心肌缺血再灌时,iPLA2被激活并发挥着重要作用.本文就iPLA2做一个简介并阐述其与心肌缺血再灌注有关的性质与功能.
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钙拮抗剂调节钙非依赖磷脂酶A2拮抗心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤的研究
目的 探讨经典钙拮抗剂维拉帕米(Ver)、硝苯地平(Nif)、地尔硫(Dil)及本课题组合成的新型钙拮抗剂-碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)通过调节钙非依赖磷脂酶A2(iPLA2)抗心脏微血管内皮细胞(CMECs)缺氧/复氧(H/R)损伤的作用与机制.方法 培养大鼠原代CMECs,制作H/R模型,在H/R的基础上,用不同浓度梯度的钙拮抗剂及F2处理细胞,比色法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的漏出反映细胞损伤程度;酶联免疫吸附法(ELISA)测定白介素-6(IL-6)和花生四烯酸(AA)的含量;TUNEL法检测细胞晚期凋亡水平;Real-time PCR检测iPLA2 mRNA表达,Western blot检测iPLA2蛋白表达.结果 钙拮抗剂F2、Ver和Nif均可量效-依赖性地减少H/R过程中LDH漏出(P<0.05),降低IL-6和AA含量(P<0.05),减少细胞凋亡(P<0.05),而Dil对上述指标均无作用;同时,F2和Ver均可量效-依赖性地降低iPLA2 mRNA和蛋白表达水平,Nif和Dil对H/R过程中iPLA2 mRNA和蛋白表达水平并无影响.结论 H/R可导致CMECs损伤,钙拮抗剂F2、Ver、Nif能保护CMECs抗H/R损伤,Dil无抗H/R损伤的作用;而F2和Ver是部分通过调节iPLA2抗H/R损伤作用的.