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miR-146a 通过抑制 ROCK 1基因的表达促进去势抵抗性前列腺癌细胞的凋亡
目的:探讨miRNA-146 a对激素非依赖前列腺癌细胞DU145、PC3凋亡的影响极其作用机制。方法:通过Hoechst染色方法观察高表达miRNA-146 a对前列腺癌细胞凋亡的影响。通过免疫印迹法( Western blot)观察高表达miRNA-146a对cleave-caspase 3表达的影响。构建ROCK13′UTR报告基因质粒,合成miRNA-146a minics,分别共转染DU145、PC3两种前列腺癌细胞,采用荧光素酶报告基因( Luciferase )实验检测miR-146 a是否与ROCK1相结合,采用免疫印迹法( Western blot )检测miR-146 a干扰后ROCK1蛋白量的表达。结果:Hoechst染色显示,转染miRNA 146a后可以促进DU145和PC3的凋亡。高表达miR-146a后cleave-caspase 3表达增加。 Luciferase及Western blot显示,miR-146 a通过与靶基因ROCK13′UTR的结合抑制ROCK1的表达。结论:ROCK1是miR-146a的靶基因,miR-146a通过抑制ROCK1基因的表达促进前列腺细胞的凋亡。
关键词: 前列腺癌 Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1 细胞凋亡 -
中耳胆脂瘤中Rock1和Rock 2的表达研究
目的 探讨Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(Rho-associated coiled coil-containing protein kinase 1,Rock1)和Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)在胆脂瘤发生过程中的作用.方法 采用免疫组织化学方法检测27例中耳胆脂瘤标本(病例组)和20例外耳道皮肤组织标本(对照组)中Rock1和Rock 2的表达.结果 Rock1蛋白阳性表达定位于细胞质,其在中耳胆脂瘤上皮中阳性表达率为77.78%(21/27),高于对照组外耳道皮肤的25.0%(5/20),差异有统计学意义(P<0.05);Rock 2蛋白阳性表达主要定位于细胞质,其在中耳胆脂瘤上皮的阳性表达率为25.93%(7/27),低于对照组外耳道皮肤的90.0%(18/20),差异有统计学意义(P<0.05);在中耳胆脂瘤上皮组织中,Rock 1和Rock 2蛋白的表达呈负相关(r=-0.497,P=0.008<0.05).结论 中耳胆脂瘤上皮中Rock1高表达和Rock2的低表达可能在中耳胆脂瘤角质细胞的分化过程中起重要作用.