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凝血因子 FXa文献资料
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抑肽酶基因的克隆和表达
抑肽酶作为天然非特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂,用途广泛.目前抑肽酶制品主要从牛肺中提取.用基因重组技术,将抑肽酶结构基因导入表达载体pGrxA,并在抑肽酶基因上游引入FXa识别位点.将重组质粒转化至OrigamiTM中,用异丙基硫代β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,产物以可溶性形式存在于胞内.将菌体超声破壁和离心,融合蛋白经分子筛层析和离子交换层析纯化后,用FXa切割该融合蛋白可得到N端不含多余氨基酸残基且与天然构像一致的活性抑肽酶.
