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  • 生物转化法制备葫芦素B产酶菌株的筛选与鉴定

    作者:陈虹;陈蔚青;梅建凤;李莎

    葫芦素B(CuB)是临床用于治疗肝炎和肝癌等疾病的药物,开发以葫芦素B葡萄糖苷(CuBg)为原料生产CuB的生物转化工艺,具有潜在的工业应用价值,获得一株特异性产酶菌株是转化工艺开发的首要工作.首先利用甜瓜蒂和污水富集培养产酶菌株,平板分离法获得纯培养;之后以含CuBg的甜瓜蒂提取物为底物,筛选出能将CuBg转化为CuB高产菌株,并对筛选获得的菌株进行分类鉴定;后对转化工艺进行优化,提高转化率.结果分离到一株编号为RW-2放线菌菌株,其滤除菌丝的发酵液处理甜瓜蒂提取物,其中的CuBg被转化为CuB,CuB的含量显著提高;经形态学鉴定和16S rDNA序列分析,确定该菌株是一株链霉菌(Streptomyces sp.);经过转化工艺优化后,该菌株发酵制备的粗酶液转化甜瓜蒂提取物,其中CuB的含量从1.50 g/L提高到3.27 g/L,提高了1.18倍,CuB的转化得率达99.5%.利用生物转化法将低活性的CuBg转化高活性的CuB,具有反应条件温和、工艺简单,转化得率高的优点,在药物CuB生产中有一定的应用价值.

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