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优化的高盐沉淀法文献资料
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钉螺线粒体基因组DNA提取方法的优化及比较
目的 优化提取钉螺线粒体基因组DNA(mtDNA)的方法.方法 应用高温裂解、蛋白酶K变温消化和醋酸钾纯化对传统的高盐沉淀法进行优化,并将优化的高盐沉淀法与蔗糖密度梯度离心法、传统的高盐沉淀法进行比较.用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和线粒体COX1基因PCR扩增产物鉴定提取的mtDNA,并用核ITS基因PCR扩增产物检测有无核DNA污染.结果 优化的高盐沉淀法获得的mtDNA浓度和产量较高,差异有统计学意义(F=3032.65、10185.00,P均<0.01).用凝胶电泳检测后未发现核DNA与蛋白质污染,质量可满足于PCR、测序等分子生物学研究.结论 优化的高盐沉淀法简易高效,成本低,获得的mtDNA能满足相关分析要求.
