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氨基酸转运体-2文献资料
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L-精氨酸转运体-2的siRNA表达载体的构建及鉴定
目的:构建氨基酸转运体-2(CAT-2)的靶向小分子干扰RNA (siRNA)表达载体质粒,并测序鉴定,为下一步研究靶向siRNA对CAT-2蛋白表达和L-argine/iNOS/NO通路的影响建立基础. 方法:根据L-精氨酸转运体CAT-2的mRNA序列及siRNA设计原则,并经BLAST比对,设计合成4对siRNA寡聚单链DNA,退火成双链dsDNA,用载体构建试剂盒BLOCK-iTTM Pol II miR RNAi Expression Vector Kit with EmGFP进行重组质粒构建,将4对dsDNA分别插入到siRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR中,构建4个siRNA表达质粒,并转化至感受态细菌DH5.筛选阳性克隆并提取重组质粒后测序分析. 结果:CAT-2的siRNA重组载体质粒测序结果证实表达载体构建成功. 结论:L-精氨酸转运体CAT-2 siRNA表达载体质粒成功构建,为下一步研究靶向siRNA对CAT-2蛋白表达和L-arg/iNOS/NO通路的影响建立基础.
关键词： 左旋精氨酸 氨基酸转运体-2 靶向小分子干扰RNA
