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  • 呼吸道合胞病毒A与B亚型多重荧光PCR检测方法的建立及应用

    作者:刘文宽;周荣;陈德晖;檀卫平;邱淑燕;许多;李潇

    目的 建立一种新的呼吸道合胞病毒(RSV)分型检测方法,用于快速检测和监测.方法 针对RSV G基因设计引物、探针,并引入人β-actin基因(ACTB)作为内参质控,建立RSV-A、RSV-B多重荧光PCR检测方法.使用多种常用呼吸道病原体及体外转录RNA产物考核其特异性和灵敏度.并对2015年1月至12月广州两家医院的儿童急性呼吸道感染患者进行检测.结果 所建立的多重检测方法未见非特异性反应.RSV-A、RSV-B和ACTB分别可检测低至4、8和12 copies/μL的RNA模板,且分别在10 ~l×1010 copies/μL、100 ~1×1010 copies/μL和100 ~1×1010 copies/μL时具备良好的线性关系,线性相关系数r2均大于0.99.儿童急性呼吸道感染患者监测中,RSV-A为期间优势亚型.结论 本研究所建立的RSV-A、RSV-B多重荧光PCR检测方法,具有较好的特异性、灵敏度、可操作性,可用于相关研究.

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